СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ БИОЛОГИЯ, 2008, № 2, с. 35-39

Иммуногенетика сельскохозяйственных видов животных

УДК 636.2+636.291]:577.17

ОЦЕНКА ГЕНЕТИЧЕСКОЙ СТРУКТУРЫ ПОПУЛЯЦИЙ ПО
ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИМ МАРКЕРАМ ПРИ ВЫВЕДЕНИИ
ПОРОДНЫХ ГРУПП ЗЕБУВИДНОГО МОЛОЧНОГО СКОТА

Т.М. ШУАЙБОВ, Г.Н. СЕРДЮК, Ш.З. БАХАРЧИЕВ

Изучали динамику полиморфизма групп крови и белков сыворотки крови, а также показателей естественной резистентности у гибридов F1, F2 и F3, полученных при выведении породных групп молочного зебувидного скота в скрещиваниях черно-пестрая порода ´ зебу и красная степная порода ´ зебу в условиях Республики Дагестан.

Ключевые слова: группы крови, белки сыворотки крови, естественная резистентность, адаптация, крупный рогатый скот, зебувидный скот, F1, F2, F3, генетическое сходство и различие.

Key words: blood groups, blood serum proteins, natural resistance, adaptation, cattle, zebu-like cattle, F1, F2, F3, genetic similarity and the difference.

Известно, что полиморфизм групп крови и белков сыворотки крови может успешно использоваться для контроля за микроэволюционными событиями, селекционными изменениями и степенью консолидации в популяциях сельскохозяйственных животных в процессе отбора и при воспроизводстве стада. Так, В.С. Деева с соавт. (1) изучили микрофилогенез стад сибирского черно-пестрого скота по группам крови, С.И. Шадманов с соавт. (2) — черно-пестрого скота Узбекистана, А.М. Машуров с соавт. (3) — черно-пестрого скота европейской части России. О.Ю. Головченко (4) рассмотрела аспекты дифференциации генофонда групп крови в популяциях мясного крупного рогатого скота (КРС), разводимого в Таджикистане.
Ранее R. Ronda с соавт. (5) сообщали о результатах работ по скрещиванию голштино-фризского скота с зебу с использованием полиморфных систем групп крови в качестве генетических маркеров и создании высокопродуктивного гибридного стада (3/4 голштино-фризский скот ´ 1/4 зебу). Климатические и кормовые условия Республики Дагестан диктуют необходимость создания животных, обладающих не только высокой продуктивностью, но и устойчивостью к заболеваниям, прежде всего паразитарным и инвазионным. В этой связи в последние годы в результате скрещивания зебу с животными черно-пестрой и красной степной пород КРС выведены две новые породные группы молочного скота — черно-пестрая ´ зебу и красная степная ´ зебу.
Цель нашей работы заключалась в исследовании характера микрофилогенеза и направленности генетической изменчивости у гибридов F1, F2 и F3 в процессе создания указанных породных групп зебувидного молочного скота с использованием иммуногенетических маркеров.
Методика. Объектами изучения были животные трех пород КРС (красная степная, черно-пестрая и зебу), гибриды красная степная ´ зебу и черно-пестрая ´ зебу различной кровности (F1, F2 и F3), а также две популяции кавказского бурого скота (Махачкалинский молочный комплекс ОПХ Дагестанского НИИ сельского хозяйства, колхозы «Дружба» и «им. Даниялова», совхоз «Дылымский», Республика Дагестан). Формировали группы животных — аналогов по возрасту и живой массе, которые находились в одинаковых условиях кормления и содержания, типичных для хозяйств.
Исследование генофонда по 9 системам групп крови (A, B, C, F, J, L, M, S и Z) проводили в лабораториях иммуногенетики Всероссийского НИИ животноводства и Всероссийского НИИ генетики и разведения сельскохозяйственных животных с использованием реагентов, полученных в этих институтах и прошедших неоднократные международные и всесоюзные проверки, подтвердившие их высокую специфичность. Группы крови, частоту генотипов и аллелей определяли по общепринятым методикам (6). При анализе групп крови рассчитывали генетическое расстояние между породами и популяциями, исходными породами и их помесями разной кровности по M. Ней (7).
Полиморфизм иммуноглобулинов, трансферрина, церулоплазмина, амилазы выявляли методом горизонтального электрофореза в крахмальном геле по О. Смитис (1955) в модифицикации Б. Ганэ (1966). Генетическую структуру по локусам полиморфных белков сыворотки крови оценивали по частоте их генотипов.
Показатели естественной резистентности определяли у животных красной степной породы и ее помесей с зебу: количество общего белка —общепринятым методом, иммуноглобулинов — в реакции радиальной иммунодиффузии, активность лизоцима — по отношению к тест-культуре Micrococuslisodecticus, выращенной на мясо-пептонном агаре, с использованием фотоэлектроколориметрического метода В.Г. Дорофейчука (8) в модификации Ю.М. Маркова (1975), активность комплемента — по методу Г.Ф. Вагнера (9) в модификации О.Н. Грызловой с соавт. (10).

Результаты. При оценке генетического сходства между исходными породами и их потомками F1, F2 и F3 по частоте аллелей групп крови (табл. 1) оказалось, что наиболее удалены от гибридных форм новой породной группы исходные породы скота — черно-пестрая, красная степная и зебу. Так, гибриды F1, имеющие по 1/2 доле крови черно-пестрой породы и зебу, занимают промежуточное положение между черно-пестрой и зебу; гибриды F2 (3/4 доли крови черно-пестрой породы и 1/4 — зебу), а также гибриды F3 (7/8 долей крови черно-пестрой породы и 1/8 — зебу) генетически ближе к черно-пестрой породе, чем к зебу. Аналогичное расположение исходных пород по отношению к гибридам разных поколений наблюдается и у другой породной группы скота, выведенной в результате скрещивания животных красной степной породы с зебу (см. табл. 1): промежуточное положение гибридов F1 и большее сходство гибридов F2 и F3 с красным степным скотом. В целом данные таблицы 1 убедительно демонстрируют характер генетических взаимосвязей исходных пород и их гибридов разной кровности.

 1. Показатели генетического расстояния (D) между популяции-ями исходных пород и их гибридами, вычисленные по частоте аллелей групп крови

Сравниваемая пара
пород, популяций

D

Черно-пестрая (n = 140) — зебу (n = 5)
Черно-пестрая — F1 (n = 134)
Черно-пестрая — F2 (n = 131)
Черно-пестрая — F3 (n = 137)
Зебу — F1
Зебу — F2
Зебу — F3
F1 — F2
F1 — F3
F2 — F3

0,4335
0,1420
0,0996
0,0902
0,1829
0,2520
0,2646
0,0723
0,0775
0,0614

Красная степная (n = 162) — зебу (n = 5)
Красная степная — F1 (n = 173)
Красная степная — F2 (n = 104)
Красная степная — F3 (n = 99)
Зебу — F1
Зебу — F2
Зебу — F3
F1 — F2
F1 — F3
F2 — F3

0,4214
0,1099
0,0675
0,0581
0,1508
0,2199
0,2325
0,0402
0,0454
0,0293

Поскольку при создании породных групп ставилась задача за счет скрещивания с зебу повысить жирномолочность и приспособленность к климатическим и рельефным условиям Дагестана, у гибридного поголовья выявляли частоту антигенных факторов Z', V и L (соответственно А-, F- и L-систем групп крови), которые, по данным ряда авторов (4, 5, 11, 12), маркируют признак выносливости и могут эффективно использоваться при селекции. У зебу, например, антиген Z' содержится у 60, а V и L — у 90 % животных (13). Некоторые авторы (14, 15) предполагают, что аллель Vспособствует адаптации животных к горным условиям.

2. Сравнительная характеристика пород и породных групп крупного рогатого скота, разводимых в Дагестане, по частоте (%) антигенов систем групп крови

Система групп крови

Антиген

Черно-пестрая
порода,
n = 386

Черно-пестрая порода ½ зебу,
n = 219

Красная степная порода,
n = 589

Красная степная порода ½ зебу,
n = 313

Кавказский бурый скот,
n = 851

A

A1
A2
Z'

35,8
37,0

43,6
38,3
14,2

37,6
29,4

53,4
47,4
28,2

37,2
10,2
1,4

F

F
V

89,9
31,5

79,6
61,5

97,1
24,1

93,2
52,6

94,9
39,4

L

L

31,0

52,6

22,8

43,1

33,7

П р и м е ч а н и е. Прочерк означает, что антиген не выявлен.

Как показали результаты наших исследований, у черно-пестрого и красного степного скота, разводимого в Дагестане, полностью отсутствует ан-тиген Z', а у кавказского бурого скота его частота незначительна (1,4 %).
У животных гибридных групп (че-рно-пестрая ½ зебу и красная степная ½ зе-бу) вследствие скрещивания с зебу частота антигена Z' составила соответственно 14,2 и 28,2 %. Кроме того, у помесного поголовья антигены V и L соответственно F- и L-локусов групп крови встречались почти в 2 раза чаще (табл. 2).

 3. Частота аллелей гемоглобинового (Hb), трансферринового (Tf), церулоплазминового (Cp) и амилазного (Am) локусов у чистопородного красного степного и черно-пестрого скота и их гибридов с зебу разной кровности

Порода, гибрид

n

Hb

Tf

Cp

Am

А

В

А

D

Е

А

С

В

С

Красная степная

162

0,943

0,057

0,500

0,453

0,047

0,565

0,435

0,589

0,411

F1 (1/2 красная степная ½ 1/2 зебу)

173

0,738

0,262

0,323

0,505

0,172

0,670

0,330

0,707

0,293

F2 (3/4 красная степная ½ 1/4 зебу)

104

0,793

0,207

0,358

0,481

0,161

0,651

0,349

0,703

0,297

F3 (7/8 красная степная ½ 1/8 зебу)

99

0,868

0,132

0.407

0,487

0,106

0,698

0,302

0,665

0,335

Черно-пестрая

140

1,000

0

0,400

0,565

0,035

0,345

0,625

0,501

0,499

F1  (1/2 черно-пестрая ½ 1/2 зебу)

134

0,791

0,209

0,341

0,364

0,295

0,480

0,520

0,694

0,306

F2 (3/4 черно-пестрая ½ 1/4 зебу)

131

0,818

0,182

0,346

0,414

0,240

0,461

0,539

0,681

0,319

F3 (7/8 черно-пестрая ½ 1/8 зебу)

137

0,837

0,163

0,387

0,376

0,237

0,449

0,551

0,602

0,398

У выведенных групп зебувидного скота также значительно увеличилась частота аллелей HbB,TfE, CpA и AmB соответственно гемоглобинового, трансферринового, церулоплазминового и амилазного локусов, которая у исходных пород красная степная и черно-пестрая довольно низкая (по HbB — соответственно 0-0,057, по TfE — 0,035-0,047) (табл. 3). Повышение частоты аллеля HbВ Е.К. Меркурьева с соавт. (14) связывают с адаптацией животных к условиям высокогорья. Что касается церулоплазмина и амилазы, то частота аллелей CpA и AmB у гибридного поголовья всех трех поколений повысилась почти в 1,5 раза. Причем обращает на себя внимание тот факт, что частоты аллелей HbA, TfA, CpA и AmBу гибридов зебу возрастали по мере увеличения доли крови черно-пестрой или красной степной пород. Одновременно с уменьшением кровности по зебу у гибридов наблюдалось снижение частот аллелей HbB, TfE, CpC и AmC. Следовательно, исходные породы (черно-пестрая, красная степная и зебу) влияли на формирование генофонда гибридного поголовья сравнительно равномерно в зависимости от доли кровности.

4. Показатели (M±m) гуморального иммунитета у животных красной степной породы и разных поколений ее гибридов с зебу

Порода,
гибрид

n

Содержание

Активность, ед/мл

общего
белка, г%

иммуноглобулинов, мг/мл

лизоцима

комплемента

Красная степная

162

7,80±0,14

17,80±0,40

17,60±0,84

95,70±5,70

Гибрид:

 

 

 

 

 

F1
F2
F3

173

8,10±0,32

20,00±0,34*

21,05±0,22*

157,30±1,94**

104

8,00±0,27

19,40±0,28*

20,60±0,28*

146,50±2,54**

99

7,90±0,12

18,60±0,32*

20,10±0,28*

130,70±2,08**

* р £ 0,05; ** р £ 0,01.

При сравнении показателей гуморального иммунитета для выяснения, повышается ли естественная резистентность у гибридного поголовья по сравнению с исходной красной степной породой (табл. 4), оказалось, что у зебувидного скота полученной породной группы они значительно возрастают, особенно в F1 и F2. В то же время в F3 их величина снижалась по сравнению с выявленной в F1 и F2, оставаясь, однако, больше, чем у животных красной степной породы. Так, у гибридов F3 (7/8 красная степная ½ 1/8 зебу) содержание иммуноглобулинов и общего белка в сыворотке крови было соответственно на 4,5 и 1,5, активность лизоцима и комплемента — соответственно на 11,4 и 13,6 % выше по сравнению с чистопородным красным степным скотом. Это указывает на увеличение интенсивности обмена веществ у гибридных животных по сравнению со скотом красной степной породы, их большую пластичность, лучшую адаптационную способность и, следовательно, повышение устойчивости к заболеваниям. Обращает на себя внимание тот факт, что по мере уменьшения доли крови зебу у гибридов наблюдалось снижение изученных показателей гуморального иммунитета.
Таким образом, результаты исследований групп крови и белков сыворотки крови, а также показателей естественной резистентности позволили проследить за происходящими генетическими изменениями в поколениях гибридов разной кровности при выведении новых породных групп зебувидного скота. Для зебувидного скота (7/8 черно-пестрая порода ½ 1/8 зебу и 7/8 красная степная порода ½ 1/8 зебу) характерна бóльшая интенсивность обмена веществ по сравнению с животными исходных пород, о чем свидетельствует увеличение содержания общего белка, иммуноглобулинов и более высокая активность лизоцима и комплемента. Все это указывает на более высокую адаптационную способность полученных породных групп в природно-климатических условиях Дагестана.

Л И Т Е Р А Т У Р А

  1. Д е е в а  В.С.,  М а ш у р о в  А.М.,  С у х о в а  Н.О. Микрофилогенез стад сибирского черно-пестрого скота по антигенам эритроцитов. Сиб. вест. с.-х. науки, 1988, 4: 54-57.
  2. Ш а д м а н о в  С.И.,  М а ш у р о в  А.М.,  А х м е д о в  К. и др. Генетические аспекты микрофилогении стад черно-пестрого скота Узбекистана. Биол. науки, 1989, 5: 81-84.
  3. М а ш у р о в  А.М.,  Р у б е н к о в  А.А.,   С о р о к о в о й  П.Ф. и др. Сравнительные аспекты микрофилогении популяций черно-пестрого голштинизированного и гибридного скота. С.-х. биол., 1990, 4: 62-66.
  4. Г о л о в ч е н к о  О.Ю. Генофонд пород крупного рогатого скота Таджикистана по группам крови, пути его сохранения и рационального использования. Автореф. канд. дис. Л.−Пушкин, 1988.
  5. R o n d a  R.,  G r a n a d o  A.,  B e r o v i d e s  V. Corrlation entre tipo de transferrina y caracteres de production lehera en al Ganado Polatein. Rev. Cub. Cienc. Vet., 1983, 6: 37-43.
  6. С о р о к о в о й  П.Ф. Использование групп крови крупного рогатого скота в исследовательской работе. Сб. научн. работ ВИЖ, 1966, 2.
  7. Н е й  М. Генетические расстояния и молекулярная таксономия. В сб.: Вопросы общей генетики. М., 1981.
  8. Д о р о ф е й ч у к  В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом. Лаб. дело, 1968, 1: 28-30.
  9. В а г н е р  Г.Ф. Колориметрическое определение комплементарной энергии крови. Лаб. дело, 1963, 1: 44-46.
  10. Г р ы з л о в а  О.И.,  Е м е л ь я н е н к о  П.А.,  Д е н и с е н к о  В.И. Модифицированный метод O. Barta, V. Barta для определения гемолитической активности сыворотки крови крупного рогатого скота. С.-х. биол., 1978, XIII(3): 433-435.
  11. O s t e r h o f f  D.R. Blood group gene frequencies in South African cattle breeds. Proc. X Eur. Conf. anim. blood groups biochem. polymorph. Paris, 1967: 107-114.
  12. R o d r i q u e s  A.,  M i t a t  J. Estudio comparativo de las frequencias ganicas en cinci sistemas de grupos senquineos  eutre bovinas Cubu: Santa Gertrudas y Criollo. Rev. Cuba. Cienc. Vet., 1972, 3(2): 155-157.
  13. S u z u k i S.,  A m a n o  T.  Serological observations on Brazilian zebu cattle. Anim. Blood groups Biochem. Genet., 1973, 4: 233-235.
  14. М е р к у р ь е в а  Е.К.,  С к р и п ч е н к о  Г.Г.,  Б е л я е в а  Н.Б.  Генетические и селекционные аспекты повышения естественной резистентности молочного скота.  В кн.: Генетическая устойчивость с.-х. животных к заболеваниям. М., 1983: 18-19.
  15. С о р о к о в о й  П.Ф., К я з и м о в  С.Б.  Сравнительные иммуногенетические исследования групповых эритроцитарных антигенов у крупного рогатого скота и буйволов.  Генетика, 1979, 5(4): 44-49.

ГНУ Дагестанский НИИ сельского хозяйства,
367014 Республика Дагестан, г. Махачкала, просп. Акушинского,
Научный городок,
e-mail: niva@dinet.ru;
ГНУ Всероссийский НИИ генетики и разведения сельскохозяйственных животных Россельхозакадемии,
196601 г. С.-Петербург—Пушкин, Московское ш, 55а,
e-mail: spbvniigen@mail.ru

Поступила в редакцию10 декабря 2007 года

 

ESTIMATION OF GENETIC STRUCTURE OF POPULATIONS ON IMMUNOGENETIC MARKERS DURING SELECTION OF BREED GROUPS OF ZEBU-LIKE DAIRY CATTLE

T.M. Shuaibov, G.N. Serdyuk, Sh.Z. Bakharchiev

S u m m a r y

The authors studied the dynamics of polymorphism of blood groups and proteins in blood serum, and also the indices of natural resistance in hybrids F1, F2 and F3 obtained during selection of breed groups of dairy zebu-like cattle in crossings 7/8 of Black-and-White breed ´ 1/8 zebu and 7/8 Red Steppe breed ´ 1/8 zebu in the conditions of Dagestan.