Сельскохозяйственная биология, 2010, № 6, с. 100-103.

УДК 636.2:619:591.111.1

ДИНАМИКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ В ПОСТНАТАЛЬНОМ ОНТОГЕНЕЗЕ У ПОМЕСНЫХ ТЕЛОК

Н.В. САМБУРОВ

В условиях научно-производственного опыта исследовали иммунологические показатели в периферической крови у черно-пестрых голштинизированных ремонтных телок в разные периоды постнатального онтогенеза. Выявили, что становление системы Т- и В-клеточного иммунитета у телок происходит в первые 30 сут жизни. Количественное содержание лейкоцитов и популяций лимфоцитов изменялось в зависимости от возраста.

Ключевые слова: лейкоциты, популяция, субпопуляция, лимфоциты, Т- и В-клетки, Т-хелперы, Т-супрессоры, иммунологические индексы.

В последние два десятилетия во многих регионах Российской Федерации ведется работа по созданию новых типов черно-пестрого скота на основе его скрещивания со специализированным в молочном направлении голштинским. По данным ряда авторов, при чистопородном разведении и оптимальном кормлении показатели продуктивности молочного скота за счет генетического улучшения могут возрасти лишь на 1,5-2,5 % (или 45-120 кг) в год (1-3). Производственная практика показывает, что наибольший прирост показателей достигается при межпородном скрещивании со специализированными породами мирового генофонда. Реализация селекционных программ по улучшению крупного рогатого скота требует изучения системы защиты организма (в том числе клеточного звена иммунитета) у помесных животных с учетом их возраста, генотипа, условий выращивания, влияния различных стрессоров.

Иммунная система, как известно, — важнейшая гомеостатическая система, во многом определяющая состояние здоровья и адаптивные возможности животных. Лимфоциты относятся к ключевым иммунокомпетентным клеткам. Т-лимфоциты обеспечивают иммунный ответ на воздействие патогенных агентов — вирусов, бактерий, грибов. В этом процессе участвуют три субпопуляции клеток: Т-хелперы (Th), обеспечивающие развитие гуморального и клеточного ответов, активизацию макрофагов; цитотоксические Т-клетки (Tc), участвующие в разрушении чужеродных или инфицированных клеток; Т-супрессоры (Ts), подавляющие иммунный ответ и отвечающие за иммуносупрессию, обусловленную микроорганизмами. В-лимфоциты предназначены для реализации гуморального иммунного ответа с образованием специфических антител (4, 5). В последние годы проведены исследования иммунного статуса молодняка крупного рогатого скота, выращиваемого в разных экологических и технологических условиях (6, 7). Однако работ, посвященных количественному составу клеточных элементов лимфоидной системы на популяционном и субпопуляционном уровнях у ремонтных телок с высоким генетическим потенциалом продуктивности, крайне мало.

Нашей целью было изучение динамики содержания иммунокомпетентных клеток в крови у помесных телок в постнатальном онтогенезе.

Методика. Научно-производственный опыт проводили в 2005-2007 годах (ФГУП Учебно-опытное хозяйство «Знаменское» Курской государственной сельскохозяйственной академии, Курский р-н, Курская обл.). Объектом исследования служили черно-пестрые голштинизированные ремонтные телки (15 гол.), полученные от коров со средним удоем более 5300 кг за лактацию. Кормление подопытных животных осуществлялось согласно рекомендациям ВАСХНИЛ (1985), условия содержания соответствовали зоогигиеническим требованиям.

Кровь у телок отбирали при рождении, в возрасте 1; 5; 15 сут, а также 1; 3; 6; 9; 12 и 18 мес. В цельной крови подсчитывали число лейкоцитов кондуктометрическим методом, в мазках крови, окрашенных по Романовскому-Гимзе, определяли лейкограмму (8). Иммунологические исследования включали тесты первого и второго уровней, предложенные для клинических исследований. Количество Т-лимфоцитов определяли в реакции спонтанного розеткообразования (Е-РОК) с эритроцитами барана, В-лимфоцитов — методом комплементарного розеткообразования (ЕАС-РОК) с эритроцитами мыши (9), число Т-хелперов и Т-супрессоров — нагрузочной пробой с теофиллином (10). Показатели иммунного статуса использовали для расчета следующих индексов: Т/В — отношение числа Т-кле-ток к числу В-клеток; лейко-Т-клеточного (ЛТИ) — числа лейкоцитов к числу Т-лимфоцитов в 1 мкл крови; лейко-В-клеточного (ЛВИ) — числа лейкоцитов к числу В-лимфоцитов в 1 мкл крови; иммунорегуляторного — отношение числа Т-хелперов к числу Т-супрессоров.

Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием стандартного пакета программ «Анализ данных» в системе Microsoft Exсel 7.0 for Windows 98. Обрабатывали показатели 10 животных (остальные по разным причинам были выбракованы).

Результаты. У новорожденных телочек в крови отмечали пониженное число лейкоцитов и лимфоцитов, после выпойки молозива оно повышалось в 1,4 раза. На 5-е сут постнатального периода содержание лейкоцитов составляло в среднем 7,27±0,04x10⁹/л, лимфоцитов — 4,68±0,06x10⁹/л; на 15-е сут жизни абсолютное число лимфоцитов повысилось на 6 % в результате увеличения содержания Т- и В-популяции клеток (табл. 1).    

Выявлены достоверные (Р < 0,05) различия между числом лимфоцитов у телят при рождении и в суточном возрасте (2,92±0,01x10⁹/л и 4,17±0,02x10⁹/л) по сравнению с животными 15-суточного и более старшего возраста (4,96±0,09x10⁹/л и 5,51±0,11x10⁹/л), а также между содержанием Т- и В-клеток у новорожденных (соответственно 45,90±0,74 %, 1,34±0,02x10⁹/л и 9,80±0,39 %, 0,29±0,01x10⁹/л) и у телят месячного возраста (53,70±0,52 %, 2,96±0,06x10⁹/л и 15,20±0,44 %, 0,84±0,03x10⁹9/л) (табл. 1). В возрасте 3 мес происходило снижение функциональной активности популяций лимфоцитов. В этот период по сравнению с возрастом 1 мес абсолютное число Т-клеток уменьшалось на 23, В-клеток — на 35 %. По достижении телками 6-месячного возраста и до конца наблюдений отмечали относительную стабилизацию в крови числа лейкоцитов, лимфоцитов, Т- и В-популяций клеток. Количество лейкоцитов колебалось от 7,28±0,09 до 7,35±0,15x10⁹/л; лимфоцитов — от 4,48±0,04 до 4,61±0,03x10⁹/л; Т-лимфоцитов — от 2,17±0,05 до 2,29±0,06x10⁹/л; В-лимфоцитов — от 0,54±0,03 до 0,57±0,02x10⁹/л.  

Абсолютное число как Т-хелперов, так и Т-супрессоров было наименьшим в первые 5 сут жизни телят (табл. 2). В этот возрастной период число Т-хелперов колебалось от 0,81±0,01x10⁹/л до 1,31±0,03x10⁹/л, Т-супрес-соров — от 0,53±0,01x10⁹/л до 0,85±0,02x10⁹/л. В 30-суточном возрасте средние значения этих показателей составляли 1,80±0,04x10⁹/л и 1,16±0,02x10⁹/л, увеличившись соответственно на 0,99x10⁹/л и 0,63x10⁹/л (Р < 0,001). Абсолютное число Т-хел-перов в крови животных на 90-е сут равнялось в среднем 1,38±0,03x10⁹/л, что было на 0,42x10⁹/л меньше, чем в 30-суточном возрасте (Р < 0,001). К 6-месячному возрасту содержание Т-хелперов снижалось до 1,29±0,03x10⁹/л. Число Т-супрессоров в 3-месячном возрасте составляло 0,90±0,02x10⁹/л, или на 0,26x10⁹/л меньше, чем в 1-й мес жизни (Р < 0,001). В годовалом возрасте у телок наблюдалась количественная стабилизация субпопуляций Т-клеток: число Т-хелперов равнялось 1,35±0,04x10⁹/л, Т-супрессоров — 0,87±0,02x10⁹/л.   
Величина индекса Т/В при рождении составляла 4,73±0,17 и к 15-суточному возрасту увеличилась до 5,00±0,15 (рис.). В возрасте 1 мес она была равна 3,57±0,13, 3 мес — 4,26±0,22, 6 мес — 4,17±0,26, затем снижалась до 4,00±0,19 (9 мес) и 3,96±0,25 (12 мес), а к концу наблюдений — повышалась до 4,11±0,23.

При рождении телята имели самые высокие значения индексов ЛТИ и ЛВИ — соответственно 3,64±0,06 и 17,25±0,69. В период с 15- до 30-суточного возраста отмечали снижение индекса ЛТИ до 2,45±0,04-2,50±0,05. Индекс ЛВИ у 15-суточных телят был равен 12,24±0,40, у 30-суточных — 8,88±0,26. В остальные изученные возрастные периоды ЛТИ находился в пределах 3,13-3,39, ЛВИ — 12,81-13,99. Отношение числа Т-хелперов и Т-супрессоров в период наблюдений варьировало от 1,53±0,02 (при рождении) до 1,59±0,06 (в 180-суточном возрасте).

Таким образом, становление системы Т- и В-клеточного иммунитета у помесных телок происходит в первые 30 сут постнатального онтогенеза. При рождении животных Т-лимфоциты обладают более высокой функциональной активностью, по-видимому, за счет Т-хелперов. Число и активность В-лимфоцитов в первые дни жизни понижены, что свидетельствует о несовершенстве кооперативных регуляторных взаимоотношений между иммунокомпетентными клетками. Полученные результаты подтверждают сведения о ведущей роли системы Т-клеток в контроле и регуляции иммунологического гомеостаза организма. Поскольку 1-й мес постнатального периода у телок является критическим, при организации их выращивания следует неукоснительно соблюдать все технологические приемы и осуществлять профилактические мероприятия.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. П р у д о в  А.И.,  Д у н и н  И.М. Использование голштинской породы для интенсификации селекции молочного скота. М., 1992.
2. Д у н и н  И.М. Современные аспекты племенного дела в молочном скотоводстве. Зоотехния, 1998, 11: 2-8.
3. Э р н с т  Л.К.,  П р о х о р е н к о  П.Н.,  П р у д о в  А.И. Стратегия генетического совершенствования крупного рогатого скота России. Зоотехния, 1997, 11: 2-7.
4. П е т р о в  Р.В. Иммунология. М., 1987.
5. Ф е д о р о в  Ю.Н.,  В е р х о в с к и й  О.А. Иммунодефициты домашних животных. М., 1996.
6. К р а п и в и н а  Е.В.,  Ф е д о р о в  Ю.Н.,  М а р т ы н о в а  Е.В.,  И в а н о в  Д.В.,  М а л и н е н к о  П.Е. Активность защитных механизмов у молодняка при повышенной плотности загрязнения почвы радиоцезием под влиянием препарата эпофен. С.-х. биол., 2005, 6: 69-73.
7. М о т о в а  Е.Н. Оценка биохимического и иммунологического статуса телят в ранний постнатальный период при выпаивании молозива с высоким содержанием иммуноглобулинов. С.-х. биол., 2008, 6: 84-87.
8. К о н д р а х и н  И.П.,  К у р и л о в  Н.В.,  М а л а х о в  А.Г. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание. М., 1985.
9. К а р п у т ь  И.М. Иммунология и иммунопатология болезней молодняка. Минск, 1993.
10. П е т р о в  Р.В.,  Х а и т о в  Р.М.,  П и н е г и н  Б.В. Иммунодиагностика иммунодефицитов. Иммунология, 1997, 4: 4-7.

DYNAMICS OF IMMUNOLOGICAL INDICES OF BLOOD IN POSTNATAL ONTOGENESIS IN CROSSBREED HEIFERS

N.V. Samburov

In the conditions of scientific-practical experiment the author studied the immunological indices in peripheral blood in the Black-and-White holsteined remount heifers at the different periods of their postnatal ontogenesis. It was revealed, that the formation of T- and B-cellular immunity in heifers take place at the first thirty days of their life. The number of leukocytes and lymphocyte populations was changed in connection with age.

Key words: leucocytes, populations, sub-populations, T- and B-cells, T-helpers, T-suppres-sors, immunological indices.

Оформление электронного оттиска