УДК 636.32/.38:591.11:57.083.3

ДИНАМИКА НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУННОГО СТАТУСА У ОВЕЦ В ПОСТНАТАЛЬНЫЙ ПЕРИОД И ЭФФЕКТ ИММУНОСТИМУЛЯЦИИ

С.П. ДЬЯКОВА, Л.С. ЕРМОЛОВА, Л.Д. ТИМЧЕНКО, И.В. РЖЕПАКОВСКИЙ

У овец кавказской породы определяли возрастную динамику морфологических и иммунологических показателей крови и оценивали иммуностимулирующее влияние биологически активного препарата СТЭМБ (стимулятор эмбриональный).

Ключевые слова: иммунная система, иммунный статус овец, иммуностимуляция, стимулятор эмбриональный (СТЭМБ).

 

Иммунная система, которая участвует в обеспечении адаптивных возможностей животного, представляет собой одну из важнейших гомеостатических и индикаторных систем, причем изменение иммунного статуса может служить показателем экологического неблагополучия и воздействия на организм антропогенных факторов. Нарушение функции иммунной системы рассматривается как один из патогенетических механизмов при любых отклонениях (1), поэтому предупреждение ее патологии и повышение неспецифической резистентности в онтогенезе особенно актуальны для сохранения продуктивного здоровья животных (2). Один из приемов иммунокоррекции — применение широкого спектра иммуномодулирующих препаратов, к числу которых относится новый биостимулятор СТЭМБ, полученный из неэмбриональных и эмбриональных тканей куриного яйца.

Целью нашей работы было изучение формирования иммунного статуса и возможности его коррекции с помощью биостимулятора эмбрионального (СТЭМБ) у овец в постнатальный период.

Методика. Опыты на сельскохозяйственных животных проводили в 1999-2004 годах на Опытной станции ОНО ОПХ «Темнолесское» (Шпаковский р-н, Ставропольский край), лабораторные исследования — на базе Ставропольского НИИ животноводства и кормопроизводства. Объектом исследований служили овцы кавказской породы в разные периоды онтогенеза: от рождения до 1 года, а также в возрасте 3 лет (период максимальной продуктивности животных). Исследовали кровь от 10 животных каждой возрастной группы.

Влияние различных схем применения препарата СТЭМБ на иммунный статус животных определяли на 6-месячных ярках кавказской породы, отобранных по принципу аналогов и разделенных на четыре группы (по 15 гол. в каждой). Условия кормления и содержания были одинаковыми для всех животных. Особям I и II группы препарат водили 3-кратно подкожно в дозе 0,1 мл/кг живой массы с интервалом соответственно 1 и 7 сут, животные III и IV группы служили контролем — им 3-кратно подкожно вводили физиологический раствор в дозе 0,1 мл/кг живой массы с интервалом соответственно 1 и 7 сут. Кровь для исследования отбирали на 30-е сут после последней инъекции.

Используемый в качестве средства для коррекции иммунного статуса препарат СТЭМБ изготавливается из инкубируемых куриных яиц, подвергнутых поэтапной обработке, основанной на активизации физиологических процессов в эмбрионе, принципах приготовления тканевых препаратов, которые способствуют образованию биогенных стимуляторов, а также на сохранении полезных свойств исходного субстрата (3). Препарат производится ООО НПО «БиоМодуль» (Россия) в соответствии с «Техническими условиями на экспериментальные серии 9291-007-05377152-2003», государственная регистрация № 065/005069.

В образцах крови определяли число лейкоцитов, эритроцитов и содержание гемоглобина — унифицированными методами (4); концентрацию иммуноглобулинов (в сыворотке) — методом простой радиальной иммунодиффузии по Манчини (5); число Т- и В-лимфоцитов — по реакции розеткообразования (6).

Статистическую обработку данных проводили с помощью компьютерной программы Primer of Biostatistics 4.03 для Windows XP.

Результаты. Динамика гематологических и иммунологических показателей крови у ягнят характеризовалась достоверным (Р < 0,05) снижением числа эритроцитов и количества гемоглобина соответственно с 9,24×1012/л до 9,11×1012/л и с 104,21 до 99,58 г/л в период от рождения до месячного возраста, со 2-го до 6-го мес эти показатели увеличились и практически достигли значений, характерных для животных в возрасте 1 года и 3 лет (табл. 1). Иную динамику наблюдали в отношении числа лейкоцитов, которое достоверно (Р < 0,05) повышалось до возраста 1 мес (с 7,55×109/л до 8,57×109/л), а затем изменялось волнообразно, снижаясь до 7,98×109/л (Р < 0,05) в возрасте 2 мес, увеличиваясь на 6,01 % (Р < 0,05) — в возрасте 3 мес и снова падая до 8,02×109/л в 6 мес. Высокая вариабельность числа лейкоцитов в ранний период онтогенеза, видимо, связана с особенностями становления иммунной системы. У животных в возрасте от 1 года до 3 лет гематологические показатели стабилизировались.

1. Гематологические и иммунологические показатели у овец кавказской породы в различные периоды онтогенеза (Опытная станция ОНО ОПХ «Темнолесское», Шпаковский р-н, Ставропольский край, М±m)

Возраст, сут

Эритроциты, ½1012/л

Лейкоциты, ½109/л

Гемоглобин, г/л

Концентрация иммуноглобулинов, мг/мл

IgG

IgM

IgA

0

0,14±0,01*

0,23±0,02*

0

1

9,24±0,05*

7,55±0,40*

104,21±1,64*

31,21±0,47*

3,34±0,21*

1,35±0,08*

10

9,18±0,03*

8,21±0,04*

101,81±1,22*

22,20±0,11*

0,76±0,10*

0,19±0,07*

30

9,11±0,03*

8,57±0,21*

99,58±1,47*

14,84±0,09*

1,38±0,19*

0,52±0,12*

60

9,31±0,05*

7,98±0,12*

102,50±0,08*

16,11±0,12*

1,61±0,21*

0,27±0,20*

90

9,40±0,03*

8,46±0,03*

106,08±0,05*

20,12±0,18*

1,79±0,17*

0,29±0,11*

180

9,85±0,14*

8,02±0,31*

108,60±2,62*

20,61±0,21*

1,73±0,34**

0,31±0,16**

360

11,10±0,18**

8,50±0,31*

112,01±2,90**

21,42±0,24*

1,78±0,12**

0,34±0,22**

3 года

11,06±0,28**

9,20±0,07*

111,18±3,01**

20,69±0,40*

1,76±0,05**

0,33±0,18**

П р и м е ч а н и е. Прочерк означает, что показатель не определяли.
* Р < 0,05; ** Р > 0,05.

В сыворотке крови ягнят минимальную концентрацию иммуноглобулинов (IgG и IgM — соответственно 0,14±0,01 и 0,23±0,02 мг/мл) отмечали сразу после рождения до приема молозива (IgA в образцах не обнаружены), максимальную — в 1-е сут после приема молозива (IgG, IgM и IgA — соответственно 31,21±0,47; 3,34±0,21 и 1,35±0,08 мг/мл). Наиболее выраженное уменьшение содержания IgG наблюдали у животных в возрасте 30 сут (до 14,84±0,09 мг/мл), IgM и IgA (соответственно 0,76±0,10 и 0,19±0,07 мг/мл) — в возрасте 10 сут. Различия в сроках снижения количества пассивно приобретенных иммуноглобулинов в зависимости от изотипа, очевидно, обусловлены неодинаковой скоростью их катаболизма (7).

В дальнейшем содержание иммуноглобулинов всех изотипов постепенно возрастало, что связано с их активным синтезом. В наших опытах у ягнят к 3-месячному возрасту концентрация IgG, IgM и IgA составляла соответственно 20,12±0,18; 1,79±0,17 и 0,29±0,11 мг/мл. К 6-месячному возрасту и позднее показатели стабилизировались.

Известно, что период сразу после рождения наиболее критический в отношении иммунного статуса. Второй критический период у ягнят, согласно нашим данным, приходится на 30-е сут после рождения, когда содержание иммуноглобулинов, полученных с молозивом, достигает минимальных значений вследствие катаболизма. В последующие сроки эти показатели постепенно повышаются за счет синтеза собственных иммуноглобулинов, который в ранний постэмбриональный период ингибировался материнскими.

Однако практика показывает, что при существенных нарушениях иммунного статуса в ранний период постнатального развития к 6-месячному возрасту достаточно четко проявляются признаки иммунодефицита, что требует активной стимуляции иммунных процессов.

Исследование влияния биостимулятора СТЭМБ на гематологические и иммунологические показатели 6-месячных ягнят показало (табл. 2), что число эритроцитов в крови животных при обеих схемах введения препарата значительно увеличилось по сравнению с соответствующим контролем (Р < 0,001). Так же существенно возросло количество гемоглобина (на 37,8 и 50,0 % при введении препарата соответственно с суточным и недельным интервалом) (Р < 0,001). Число лейкоцитов изменилось менее значительно: мы отмечали его повышение на 12,2 (Р < 0,005) и 17,1 % (Р < 0,005) при введения препарата соответственно по первой и второй схеме. Показатели клеточного и гуморального иммунитета при действии биостимулятора также отличались от таковых в контроле: у ягнят I и II группы доля Т- и В-лимфоцитов достоверно возрастала (при введении препарата с суточным интервалом — соответственно на 11,8 и 26,2 %, с недельным — на 22,6 и 26,6 %) (Р < 0,001).

2. Гематологические и иммунологические показатели у ягнят кавказской породы в возрасте 6 мес на фоне обработки иммуностимулирующим препаратом СТЭМБ (Опытная станция ОНО ОПХ «Темнолесское», Шпаковский р-н, Ставропольский край, М±m)

Показатель

I группа

II группа

III группа (контроль)

IV группа (контроль)

Эритроциты, ×1012/л

10,10±0,3***

10,40±0,30***

7,35±0,35***

7,45±0,44***

Лейкоциты, ×109/л

9,20±0,09**

9,60±0,20**

8,22±0,40**

8,18±0,40**

Гемоглобин, г/л

89,80±5,60***

97,80±2,60***

65,15±2,60***

65,25±2,60***

Лимфоциты, %:

 

 

 

 

Т-

20,90±0,07***

23,60±0,12***

18,70±0,12***

18,70±0,12***

В-

24,40±0,24***

25,20±0,17***

19,80±0,15***

20,00±0,22***

Концентрация имммуноглобулинов, мг/мл:

 

 

 

IgG

21,80±0,81*

22,40±0,95*

19,00±0,79*

19,04±0,8*

IgM

1,77±0,04*

1,85±0,07*

1,67±0,03*

1,68±0,03*

IgА

0,49±0,07*

0,58±0,07**

0,35±0,03*

0,30±0,03**

П р и м е ч а н и е. Описание групп, дозы и сроки введения препарата см. в разделе «Методика».
* Р < 0,05; ** Р < 0,005; *** Р < 0,001.

Концентрация иммуноглобулинов увеличивалась независимо от способа введения биопрепарата: при интервале 1 сут этот показатель для IgG, IgM и IgA возрастал соответственно на 14,6; 6,6 и 48,5 % (Р < 0,05), 7 сут — на 17,8; 11,4 (Р < 0,05) и 75,8 % (Р < 0,005) (то есть эффект был более выраженным).

Отметим, что иммуностимулирующий эффект препарата СТЭМБ в наших опытах проявляется независимо от схемы введения. Результаты проведенных исследований были взяты за основу при разработке патента «Способ повышения адаптационных возможностей овец» (8).

Таким образом, выявлена динамика некоторых гематологических и иммунологических показателей крови овец в период от рождения до 1 года и в 3-летнем возрасте, а также достоверное повышение этих показателей (в частности, у 6-месячных животных) при разных схемах обработки препаратом-биостимулятором СТЭМБ.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. М а н ь к о  В.М.,  П е т р о в  Р.В.,  Х а и т о в  Р.М. Иммуномодуляция: история, тенденции развития, современное состояние и перспективы. Иммунология, 2002, 3: 132-138.
2. А р ш а в с к и й  И.А. Механизмы и особенности физиологического и патологического стресса в различные возрастные периоды. В сб.: Актуальные проблемы стресса. Кишинев, 1976: 5-23.
3. Т и м ч е н к о  Л.Д.,  Р ж е п а к о в с к и й  И.В.,  М и х а й л е н к о  В.В. и др. Патент РФ на изобретение № 2197251. Способ приготовления биостимулятора эмбрионального. Бюл. № 3. М., опубл. 27.01.2003.
Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследования крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях. М., 1981.
4. M a n c h i n i  G.,  C a r b o n a r a  A.O.,  H e r e m a n s  I.P. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion. Immunochemistry, 1965, 2(3): 235-254.
5. Н о в и к о в  Д.К.,  Н о в и к о в а  В.И. Клеточные методы иммунодиагностики. Минск, 1979.
6. H u s b a n d  A.J.,  B r a n d o n  M.R.,  L a s c e l l e s  A.K. Absorbtion and endogenous production of immunoglobulins in calves. Austr. J. Biol. Med. Sci., 1972, 50: 491-498.
7. Д ь я к о в а  С.П.,  Т и м ч е н к о  Л.Д.,  Р ж е п а к о в с к и й  И.В. и др. Патент РФ на изобретение № 2320167 С1. Способ повышения адаптационных возможностей овец. Бюл. № 9. М., опубл. 27.03.2008.

 

DYNAMICS OF SOME PARAMETERS OF IMMUNE STATUS IN SHEEPS DURING POSTNATAL PERIOD AND EFFECT OF IMMUNOPOTENTIATION

S.P. D’yakova, L.S. Ermolova, L.D. Timchenko, I.V. Rzhepakovskii

In the sheeps of the Caucasian breed the authors determined the age dynamics of morphological and immunological parameters of blood and estimated the immunopotentiating activity of STEMB biologically active preparation.

Key words: immune system, immune status of sheep, immunestimulation, stimulator embryos (STEMB).

ФГОУ ВПО Ставропольский
государственный университет,

355009 г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1, корп. 2,
e-mail: labim@stavsu.ru; is_01@pochta.ru

Поступила в редакцию
27 мая 2008 года

 

Оформление электронного оттиска

назад в начало